Ольга троицкая: Автор: Троицкая Ольга | новинки 2023

Троицкая Ольга Георгиевна — 23 отзыва | Санкт-Петербург

Пациент
+7-921-87XXXXX

7 декабря 2022
в 23:20

+1.6 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Нормально

Отлично

Однозначно

Проверено (2)

Посетили в ноябре 2021

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-911-77XXXXX

28 ноября 2022
в 23:11

-2.0 ужасно

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Никогда

Проверено (2)

Посетили в ноябре 2022

Медицинский центр «MedSwiss» на Гаккелевской-ул. Гаккелевская, д. 21а

Пациент
+7-926-30XXXXX

17 ноября 2022
в 12:01

-0.8 плохо

Тщательность обследования

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Нормально

Ужасно

Нормально

Нет

Проверено (2)

Посетили в ноябре 2022

Клиника «Рами» на Кирочной-ул. Кирочная, д. 13

Пациент
+7-922-25XXXXX

7 июля 2022
в 11:05

+2.0 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Отлично

Отлично

Однозначно

Проверено (2)

Посетили в июле 2022

Медицинский центр «MedSwiss» на Московском-пр-кт Московский, д. 119, лит. А

Пациент
+7-911-91XXXXX

22 апреля 2022
в 13:47

-2.0 ужасно

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Никогда

Проверено (2)

Посетили в апреле 2022

Медицинский центр «MedSwiss» на Гаккелевской-ул. Гаккелевская, д. 21а

Пациент
+7-911-84XXXXX

27 сентября 2021
в 20:17

+2.0 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Отлично

Отлично

Однозначно

Проверено (1)

Посетили в июле 2021

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-906-24XXXXX

4 июня 2021
в 14:38

+1.6 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Нормально

Отлично

Однозначно

Проверено (1)

Посетили в июне 2021

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-97XXXXX

1 марта 2021
в 12:53

-2.0 ужасно

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Ужасно

Никогда

Проверено (1)

Посетили в сентябре 2019

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-904-63XXXXX

23 января 2021
в 15:34

-1.4 ужасно

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Нормально

Ужасно

Ужасно

Плохо

Никогда

Проверено (1)

Посетили в июне 2020

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-35XXXXX

20 октября 2019
в 18:51

+2.0 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Отлично

Отлично

Однозначно

Проверено (1)

Посетили в октябре 2019

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-97XXXXX

3 октября 2019
в 19:13

+2.0 отлично

Тщательность обследования

Эффективность лечения

Отношение к пациенту

Информирование пациента

Посоветуете ли Вы врача?

Отлично

Отлично

Отлично

Отлично

Однозначно

Проверено (1)

Посетили в октябре 2019

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-981-18XXXXX

15 мая 2019
в 22:26

+2.0 отлично

Проверено (1)

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-63XXXXX

22 марта 2019
в 01:22

-2.0 ужасно

Проверено (1)

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-931-29XXXXX

21 декабря 2018
в 14:33

+2.0 отлично

Проверено (2)

Посетили в декабре 2018

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-909-58XXXXX

10 декабря 2018
в 15:57

+2.0 отлично

Проверено (2)

Посетили в декабре 2018

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-40XXXXX

4 октября 2018
в 09:49

+2.0 отлично

Проверено (2)

Посетили в октябре 2018

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-908-71XXXXX

26 июля 2018
в 11:43

+2.0 отлично

Проверено (2)

Посетили в июле 2018

Клиника Пирогова-Большой проспект В. О., д. 51

Пациент
+7-921-41XXXXX

21 ноября 2017

в 12:41

+2.0 отлично

Проверено (1)

Пациент
Alexandra N.

5 ноября 2016
в 15:38

+2.0 отлично

Проверено (1)

Гость

8 февраля 2016
в 12:35

+2.0 отлично

Гость

25 декабря 2015
в 16:16

+2.0 отлично

Скрытый

23 декабря 2015
в 22:40

+2.0 отлично

Проверено (1)

Гость

12 марта 2015
в 11:07

+2.0 отлично

почему мы влюбляемся в похожих на себя и как не переубивать друг друга в отношениях

Гостья нового выпуска программы «Психология на Дожде» — системный семейный психотерапевт Ольга Троицкая. Поговорили о том, что такое подлинное партнерство и что оно дает человеку, могут ли партнеры давать друг другу свободу в реализации и творчестве: и не терять эмоциональную близость. Гостья также рассказала, как правильно доносить до своих партнеров свои претензии и быть услышанным.

Всем привет! С вами «Психология» на Дожде, я Александра Яковлева, и сегодня у меня в гостях Ольга Иосифовна Троицкая, системный семейный психотерапевт, руководитель «Мастерской Ольги Троицкой». Говорить мы будем о подлинном партнерстве. Красиво очень звучит, я бы сказала, обнадеживающе. Что это такое?

Подлинное партнерство ― дело в том, что партнерство… Психология ведь, это сейчас редко говорят, но на самом деле она родилась из философии, а в древнегреческой философии, в дальнейших, да, психологических экзерсисах, которые возникали, тема партнерства очень часто обсуждалась, потому что существует не только партнерство между людьми, но еще партнерство с природой и партнерство с богом. Да, это очень мощная энергия, связанная с пробуждением в человеке очень мощных сил. Партнерство открывает человека, целостного, живого, яркого, он может овладеть синергическими какими-то своими ресурсами, создать что-то в жизни. То есть партнерство ― это еще и энергия для тебя, подлинное партнерство, для того, чтобы ты состоялся.

Это такая очень интересная тема, и на самом деле когда мы с моей приятельницей, коллегой, другом Натальей Тумашковой делали группу по поводу взаимопартнерства, длинную, целый год она идет, то мы решили, что мы будем этап за этапом проходить то, что мешает людям подойти к подлинному партнерству, и взяли для себя очень интересную теорию имаго.

А что это за теория?

Сейчас расскажу. Это такая очень интересная теория, которая подкрепляется практикой. Дело в том, что в предыдущих наших разговорах здесь, да, мы говорили, когда мы говорили о ролях выживания, мы говорили, что человек пришел целостный, а в связи с коммуникацией со значимыми близкими взрослыми, да, людьми он приобретает некоторую странную форму.

И фактически он приходит в мир целостный и выходит из своей семьи, из своей школы, любимой мною до содрогания, которая тоже очень меняет человека: вошел один ― вышел другой. Выходит таким слегка хромающим инвалидом, психологически хромающим, а иногда и физически, тело ведь тоже зажато, с эмоциями засада, а уж с отношениями с противоположным полом одни сложности, потому что модель отношений с противоположным полом у мальчика закладывает мама, у девочки ― папа, что заложили, то заложили, да.

А коммуникацию… Ведь любой человек, который говорит: «Я буду идти своей дорогой, я буду идти своим путем, я буду сам выбирать, как это делать», да, вдруг обнаруживает, что он режет капусту как бабушка, лыжи трет как папа, а рычит на детей как мама (независимо от пола). И он обнаруживает, что, оказывается, у него огромное количество программ, которые реализуются в его жизни.

И вот идет такой инвалид. И природа устраивает очень странную вещь. У человека есть внутренняя потребность измениться, вернуться к себе подлинному. И тогда природа вставляет ловушку. Человек влюбляется, и в этот момент, вот смотрите, есть такой цикл: гусеница живет и живет, жует и жует, ползет и ползет, больше ничего ей не надо. В небо она вообще никогда не смотрит. Потом эта несчастная гусеница доползает до какого-то места и превращается в ни то, ни се, не бабочку и не гусеницу, а куколку.

Кокон.

И вдруг, я когда-то это видела в Коста-Рике в зоопарке, это фантастика, этот кокон рвется, и оттуда появляется чудесное создание, бабочка, и она смотрит на всех и в небо и сушит крылья, чтобы взлететь. И легко взлетает.

Вот когда мы выходим из своего детства и юности в семье и социуме вот такие кривые-косые, это явная гусеница, ползет себе и ползет. Вдруг гусеница видит, да, человека, который ей понравился. И в этот миг гусеница на минуту становится бабочкой. Любовь превращает как бы. Почему люди друг другу страшно нравятся, а потом всю жизнь нудят, ходят вслед за человеком и говорят: «Когда я в тебя влюбился, ты была другая». Да и ты был другой.

Говорят: «У меня выросли крылья тогда, в тот момент».

Да, в этот момент выросла, мелькнула бабочка. Они ухватились друг за друга, две бабочки. И как только у них сложились долговременные отношения, семейная система послала все семейные проекции. Ты уже как бабушка, ты уже как папа, ты уже как мама, сам себя не узнаешь. А выбирают эти люди себе гусеницу вот эту первичную, да, они ее выбирают похожую на себя примерно. Когда смотришь генограмму мужа и жены, фантастика. В этой генограмме очень много сходства.

Что такое генограмма?

Все семейные серьезные терапевты чертят генограмму, они чертят такие кружочки (это мужчины) и треугольнички-женщины, соединяют их линиями и пишут, когда родился, кем работал. Потом это начинает чертиться, и возникает весь род человека, да еще и с подробностями. Это генограмма. Там есть и дети, и бабушки, и прабабушки, и прадедушки. Там можно посмотреть, какие проекции идут из семейного рода: что говорили, кто болел, кто умирал.

Кто разводился, да?

Кто разводился. Оттуда же, из генограммы, идут эти самые «вот у нас женщины в роду все несчастные, счастливых не бывало». «У нас все мужчины уходили от жен».

«Это наше родовое проклятие».

Это не родовое проклятие, это первый раз случилось, второй раз из подражания приняли, считая, что так надо, да, а дальше оно пошло уже привычно передаваться. Поэтому генограмма, когда ее разбирают и смотрят, помогает человеку избавиться от этого, потому что он понимает, что это чужая жизнь, не его. Можно по-другому.

Так вот, генограммы мужей и жен очень часто похожи. И если там была в начале любовь, точно похожи. Там очень много одинаковых посланий. Поэтому когда люди говорят о своем сыне или дочери, я говорю: «Найдет жену, но если присмотреться, они будут похожи». «Вы что, она на него не похожа!». Я говорю: «Давайте-ка присмотримся». «Ой, и правда, во многих вещах они похожи». Просто когда наш это делает, нам приятно, а когда она это делает, нас это злит.

И вот они начинают взаимодействовать, по своему сходству они точно попадают в болевые точки друг друга. А они попали в ловушку, между ними любовь, понятно?

Ловушка любовью.

Любовью ловушка, они не могут разбежаться сразу. И у них выход какой? Или они будут бить друг друга бесконечно и в конце концов разорвут и будут ненавидеть друг друга, незаконченное действие, или они будут вынуждены поменять способ реагирования и начать переходить в себя настоящего, потихонечку идти к бабочке. Иногда для этого нужен один брак, иногда два, а иногда и три, потому что если один партнер меняется, а второй говорит: «Мне достаточно, я больше меняться не буду», тогда они расстаются, но это мягкое расставание, спокойно расстались, кончилось. И следующий партнер тогда у этого человека, который растет, будет более сепарированный, более дифференцированный от семьи, то есть более свободный.

Это имаго. Имаго ― это куколка, потому что самое страшное в жизни нашего любого человека ― это период куколки, когда ни два ни полтора. Ты чувствуешь бабочку, но ты уже не гусеница, но еще не бабочка, и выдержать вот это время, перетерпеть, чтобы открыть крылья, очень сложно. Это про подлинное партнерство. Подлинное партнерство ― это помогать друг другу расти в бабочку.

То есть как раз вырастить бабочку.

Двух бабочек.

Двух бабочек, да?

Да.

А у меня сразу картинка образная в голове. Я понимаю, что если у нас крылья и мы очень близко друг к другу этими крыльями взмахиваем, мы все равно мешаем еще друг другу. Как здесь быть?

Нет, смотрите, это проекция, да, семейная, из созависимой семьи. Если люди любят друг друга, то они должны тесниться и никуда друг друга не отпускать, все время контролировать близость. Бабочки летают как попало, но при этом сохраняют контакт, понятно? То есть подлинная сепарация ― это когда партнер летает как хочет, но эмоциональная близость сохраняется. Пусть летает, тебе это доставляет удовольствие.

Так же, как и ты летаешь, а он радуется, что ты можешь летать.

Да, ты летаешь, а он радуется. В подлинном партнерстве освобождение партнера, достижения партнера ― это тебе подарок, потому что это ваша общая радость. В созависимых отношениях ты освободился, но «Ты от меня улетишь?».

«Тебе там лучше?».

«Тебе там лучше, тебя туда тянет? А я?». Ага? Потому что гусеница же никогда не согласится, чтобы от нее улетели, зачем?

Так, а вариант, когда они так разлетятся, что уже друг друга и не увидят?

Так не бывает.

Это если мы говорим о любви, правильно?

Конечно. Нет, смотрите, оттого что они разлетятся, любовь никуда не денется. Это опять-таки старые сказки созависимой семьи. Ну как же, в город мужика отпустишь, он там другую найдет и про тебя забудет. Пусть Ломоносов ни в какие университеты не ходит, пущай, да, дома сидит, рыбу ловит. Ага? А, между прочим, его немецкая жена, дочка лавочника, воспитанная папой правильно, очень поддерживала в нем стремление стать профессором, и он всю жизнь с ней прожил, хотя летал очень высоко, да. Понятно?

А она летала?

Нет, она детей растила, дом вела. Но она была его женой, и они вполне ладили.

Так, а если одному удалось отрастить свои крылья, а второй продолжает быть гусеницей?

А второй сидит в куколке и размышляет: «Может, в гусеницу вернуться? Что-то как-то летать страшно». В принципе, в таком случае тот, кто уже начал летать, вынужден будет улететь.

А как это все вообще понять? Не все вас послушали, не все читали какие-то книги. Есть возможность как-то интуитивно в этой ситуации развернуться друг к другу и позволить отрастить эти крылья?

Нет, на самом деле, смотрите, ведь когда ты общаешься с человеком, да, у тебя есть две возможности, всего две. Одна возможность ― я все время наблюдаю, как ко мне относятся, и что бы ни делал другой человек, да, я занят тем, что я наблюдаю, как он ко мне относится и в зависимости от этого строю свое поведение. Вторая позиция ― я наблюдаю за человеком, что он в это время чувствует, что с ним происходит, и в зависимости от этого что-то говорю или действую.

Так.

И тогда другой человек в этот момент слышит невольно на подсознательном уровне как будто призыв: «Я тебя вижу, я с тобой в контакте». И тогда он тоже устанавливает контакт, и тогда намного легче договориться. Как только вы начинаете наблюдать за собой, а ведь сейчас очень многие даже начинающие терапевты очень любят, да, дрессировать, особенно женщины на это идут, мужчины почему-то не идут, странно. Это техника такая: что бы ни сделал муж или партнер, надо сесть напротив него и сказать: «Я хочу рассказать тебе, что я чувствую, когда ты… Как мне плохо, когда ты произносишь эти слова. Я достану тебя до печенок своими чувствами до тех пор, пока ты не почувствуешь вину, что ты так меня мучаешь». Послание, да.

Кошмар, сразу хочется скрыться, слиться, да, спрятаться.

Убежать и слиться.

В домик срочно.

Да. Потому что если ты в контакте с человеком, то ты говоришь: «Слушай, я понимаю, что, наверно, ты в этот момент был расстроен, не до конца услышал или не так меня понял, это вполне возможно, да, но мне не очень приятно, когда ты так себя ведешь, мне как-то не по себе». Видите, это другая история. Я вижу тебя прежде всего, да, и тогда могу рассказать и о себе. То есть мы существуем как мы. А как только человек начинает рвать вот это «мы», я, мне плохо, мне тяжело. «Когда вы так со мной разговариваете, я ужасно волнуюсь». Это руководитель, он сатанеет, ага.

«Что, я еще должен тут под тебя подстраиваться?».

Да. Если вы скажете человеку, наблюдая за ним, когда он начинает гнать волну, если вы его скажете, видя его лицо, да: «Вы знаете, мне не очень удобно, когда вы вот так со мной разговариваете, мне легче вас услышать и понять, когда вы говорите спокойно», все, гасится. Видите? Я тебя вижу, я тебя слышу, да, я не ухожу в позицию «только я, ты должен что-то делать, потому что мне плохо».

«Да, я очень хочу вас услышать и понять, но мне сложно сейчас это сделать». Я просто думаю, как так сказать, если человек уже осатанел.

Нет, смотрите, если человек осатанел, да, то вы можете, видя, что он уже осатанел, помолчать, например.

Подышать.

Подышать и помолчать, дать ему возможность услышать, что он орет. Когда человек орет, очень хорошо помолчать, дать человеку поорать, чтобы он услышал свой голос. И когда человек слышит орущий свой голос без второго поддерживающего состояние голоса, он спускает пар. Но это опять-таки необходимость в это время не думать все время: «Ой, как мне плохо, когда он орет. Это ужасно, что он орет на меня». Я, я, мне, меня, обо мне, я, я, мне, меня, обо мне ― и сразу теряется коммуникация, да. В партнерстве это самый важный момент.

Видеть друг друга, да?

Да. Мне когда-то мама сказала очень простую вещь. Она сказала: «Понимаешь, в чем дело? Есть такой очень простой фокус для того, чтобы долгие годы жить с мужчиной, чтобы он тебя еще любил».

Расскажите!

Да. Фокус такой: когда он на тебя злится и кричит, вдруг внутри себя тебе становится не по себе, потому что он кричит, у него вчера голова болела, не дай бог, у него сердце прихватит. И ты ему говоришь: «Слушай, ты не кричи, пожалуйста, у тебя же вчера сердце болело». Понятно? То есть ты видишь живого человека, который тебе дорог, несмотря на то, что он на тебя кричит, да. Вот такой фокус. И тогда он тоже, когда ты злишься, ему тебя жалко, понятно?

А если ты уходишь тут же в раковину: «Со мной так нельзя», то это уже не человек, это орудие, которое тебя достает, понятно? И тогда это орудие начинает поднимать волну агрессии и раздражения.

Ну что, за бабочек в нас.

За бабочек в нас, да, это очень важная вещь.

Спасибо вам большое. Надеюсь, не в последний раз. Напоминаю всем, что с нами была Ольга Иосифовна Троицкая, семейный системный психотерапевт. Мы говорили о подлинном партнерстве. Что ж, желаем всем летать!

Летать ― это было бы здорово.

Это было бы классно. Спасибо всем большое. Это была «Психология» на Дожде, я Александра Яковлева. Берегите себя, летайте. Всем пока!

Мишка коричневый от Ольги Троицкой

Плюшевый мишка коричневый. Плюшевый мишка коричневый. Автор Ольга Троицкая. Плюшевый мишка коричневый. Плюшевый мишка коричневый, автор Ольга Троицкая.

плюшевый мишка коричневый от ольги троицкой плюшевый мишка коричневый плюшевый мишка коричневый от Ольги Троицкой плюшевый мишка коричневый плюшевый мишка коричневый от Ольги Троицкой

поделитесь своей находкой с друзьями или нажмите Мне нравится чтобы вернуться позже

• Доставка и оплата
• Отзывы (3)
• Оставить комментарий

Политика платежей

Какие способы оплаты поддерживает Tedsby?

Мы поддерживаем все основные кредитные карты: Visa, MasterCard, American Express и Discover через PayPal. На странице оформления заказа вы можете выбрать оплату кредитной картой или PayPal. PayPal также будет принимать все основные кредитные карты.

Почему меня перевели на сайт PayPal?

После того, как вы нажмете кнопку «Купить сейчас», вы будете безопасно переведены на PayPal. PayPal предлагает дополнительную защиту как для вас, клиента, так и для исполнителя.

Правила доставки

Отправляю посылки в любую точку мира.
Я хорошо упаковываю.
Доставка ЕМС Почтой России. Способ доставки составляет около 10-20 дней, номер отслеживания я предоставляю.

Политика возврата

За многолетний опыт — возвратов нет.

Большой медведь с вышитой розой.

Отзыв от Гейл Б.
Соединенные Штаты, на июль 16, 2021

Красивый медведь! Я люблю его глаза, его плюш, вышивка так хорошо сделана, он ЗАМЕЧАТЕЛЬНЫЙ! Очень красивая упаковка ~ спасибо! Я очень рада, что он есть в моей коллекции! Прибыл очень быстро в Калифорнию, США!💘🐻🧸

шмель

Отзыв от Сью С.
Соединенные Штаты, на Может 25, 2021

ВАУ!!!!! Совершенство! Я ооооочень люблю этого медведя! Обожаю мех, кор, серые глаза и кропотливую вышивку крестиком шмеля!!!!! Он просто идеален! Мой второй медвежонок от этой художницы с вышивкой крестом, которая, я знаю, требует много времени, и она за фантастическую работу!!!! 💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖💖

Мишка с вышивкой

Отзыв от Сью С.
Соединенные Штаты, на октябрь 30, 2019

Очаровательный медвежонок! Люблю всю вышивку крестиком и его лицо! Так счастлива, что усыновила его!!!
Большое спасибо!!!!! Фантастический медведь!!!!!!

Спасибо за прекрасный обзор)))
Ольга Троицкая

Хлорохин способствует гибели клеток аденокарциномы легкого A549, подвергшихся воздействию струи холодной атмосферной плазмы

. 2023 12 января; 12 (2): 290.

doi: 10.3390/ячейки12020290.

Екатерина Патракова ^{1 2} , Михаил Бирюков ^{1 2 3} , Ольга Троицкая ^{1 3} , Павел Гугин ^{3 4} , Елена Милахина ^{3 4 5} , Дмитрий Семенов ¹ , Юлия Полетаева ¹ , Елена Рябчикова ^{1 2} , Диана Новак ^{1 2 3} , Крячкова Надежда ² , Алина Полякова ² , Мария Жилникова ² , Закревский Дмитрий ^{3 4 5} , Ирина Швайгерт ³ , Ольга Коваль ^{1 2 3}

Принадлежности

• ¹ Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ² Факультет естественных наук Новосибирского государственного университета, 630090 Новосибирск, Россия.
• ³ Институт теоретической и прикладной механики им. Христиановича СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ⁴ Институт физики полупроводников им. Ржанова СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ⁵ Кафедра радиотехники и электроники, Новосибирский государственный технический университет, 630073 Новосибирск, Россия.

• PMID: 36672225
• PMCID: PMC9857254
• DOI: 10. 3390/ячейки12020290

Бесплатная статья ЧВК

Екатерина Патракова и др. Клетки. 2023 .

Бесплатная статья ЧВК

. 2023 12 января; 12 (2): 290.

doi: 10.3390/ячейки12020290.

Авторы

Екатерина Патракова ^{1 2} , Михаил Бирюков ^{1 2 3} , Ольга Троицкая ^{1 3} , Павел Гугин ^{3 4} , Елена Милахина ^{3 4 5} , Дмитрий Семенов ¹ , Юлия Полетаева ¹ , Елена Рябчикова ^{1 2} , Диана Новак ^{1 2 3} , Крячкова Надежда ² , Алина Полякова ² , Мария Жилникова ² , Закревский Дмитрий ^{3 4 5} , Ирина Швайгерт ³ , Ольга Коваль ^{1 2 3}

Принадлежности

• ¹ Институт химической биологии и фундаментальной медицины СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ² Факультет естественных наук Новосибирского государственного университета, 630090 Новосибирск, Россия.
• ³ Институт теоретической и прикладной механики им. Христиановича СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ⁴ Институт физики полупроводников им. Ржанова СО РАН, 630090 Новосибирск, Россия.
• ⁵ Кафедра радиотехники и электроники, Новосибирский государственный технический университет, 630073 Новосибирск, Россия.

• PMID: 36672225
• PMCID: PMC9857254
• DOI: 10. 3390/ячейки12020290

Абстрактный

Холодная атмосферная плазма (ХАП) — интенсивно изучаемый метод лечения злокачественных новообразований. Различные активные соединения кислорода и азота считаются основными цитотоксическими эффекторами на биомишенях; однако всесторонний механизм взаимодействия CAP с живыми клетками и тканями остается неясным. В данной работе экспериментально определен оптимальный режим разряда (или полуселективный режим) для прямого струйного воздействия КАП на раковые клетки, при котором аденокарцинома легкого А549, A427 и NCI-h33 продемонстрировали существенное подавление жизнеспособности в сочетании со слабым снижением жизнеспособности здоровых фибробластов легкого Wi-38 и MRC-5. Гибель раковых клеток, подвергшихся воздействию CAP, и здоровых клеток в полуселективных условиях зависела от каспазы. Мы показали, что в обработанных клетках происходит накопление лизосом. Повышенная активность лизосомальной протеазы катепсина D, активация транскрипции связанного с аутофагией гена MAPLC3B в раковых клетках и изменения в белках, связанных с аутофагией, могут указывать на активацию аутофагии. Добавление ингибитора аутофагии хлорохина (CQ) после струйной обработки CAP увеличивало гибель A549.раковые клетки синергическим образом и показали слабое влияние на жизнеспособность клеток Wi-38, обработанных CAP. Понижение уровня митохондриального белка Drp1 и повышение активности белка PINK1 в клетках, обработанных CAP + CQ, указывает на то, что CQ увеличивает CAP-зависимую дестабилизацию митохондрий. Мы пришли к выводу, что КАП слабо активирует про-выживательную аутофагию в облученных клетках, а КХ способствует КАП-зависимой гибели клеток за счет дестабилизации образования аутофагосом и гомеостаза митохондрий. Подводя итог, можно сказать, что сочетание лечения CAP с CQ может быть полезным для разработки противоопухолевых подходов на основе холодной плазмы для клинического применения.

Ключевые слова: противораковые подходы; аутофагия; катепсин D; способы гибели клеток; хлорохин; струя холодной атмосферной плазмы; лизосомы; митохондриальное качество.

Заявление о конфликте интересов

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Цифры

Рисунок 1

Плазмоструйное устройство и (…

Рисунок 1

Плазмоструйное устройство и ( a ) принципиальная схема генератора плазмы…

Рисунок 1

Плазмоструйное устройство и ( a ) принципиальная схема устройства генерирования плазмы. ( b ) Зависимость температуры плазменной струи в точке контакта с биомишенью от приложенного напряжения.

Рисунок 2

Определение условий облучения раковых клеток…

Рисунок 2

Определение условий облучения раковых клеток. Условия лечения: амплитуда напряжения 3,5 кВ; текущая частота…

фигура 2

Определение условий облучения раковых клеток. Условия лечения: амплитуда напряжения 3,5 кВ; частота тока 50/4 кГц, рабочий газ — гелий; расход газа — 9л/мин. Данные МТТ-анализа жизнеспособности раковых клеток, обработанных CAP ( a ), и здоровых клеток ( b ), выполненных через 24 часа после облучения. Различия достоверны с * p < 0,05 или ** p < 0,05 между контрольной и экспериментальной группой. ( c ) Репрезентативные изображения световой микроскопии растущих клеток A549 через 6 ч после обработки CAP (1 мин). ( d ) Кривые iCELLigence в реальном времени для клеток A549, подвергшихся воздействию CAP. Черная стрелка указывает момент облучения. Различия существенны при * p < 0,05 между двумя группами.

Рисунок 3

Анализ внутриклеточных АФК в…

Рисунок 3

Анализ внутриклеточных АФК в клетках, обработанных КАП. Проточная цитометрия анализ A549 и…

Рисунок 3

Анализ внутриклеточных АФК в клетках, обработанных КАП. Проточная цитометрия анализ A549ячейки Wi-38 – после обработки CAP (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, рабочий газ – гелий, расход газа – 9 л/мин). Клетки окрашивают 10 мкМ DCFDA (который окисляется АФК до DCF) в течение 30 мин перед анализом. Данные представлены в виде процента DCF-позитивных клеток (относительно контроля) в канале FITC (λex = 488 нм, λem = 525 нм), % ± стандартное отклонение. Различия значимы с * p < 0,05 между двумя группами.

Рисунок 4

ВП вызывает каспазозависимую смерть у…

Рисунок 4

CAP вызывает каспазозависимую гибель клеток A549 и Wi-38 в полуселективных условиях…

Рисунок 4

CAP индуцирует каспазозависимую гибель клеток A549 и Wi-38 в полуселективных условиях облучения. К клеткам добавляют Z-Vad (30 мкМ) и через два часа клетки подвергают КАП в течение 60 с (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, рабочий газ — гелий, поток газа — 9л/мин). Через 24 часа клетки собирают и окрашивают аннексином V/PI. Окрашенные клетки анализируют с помощью проточной цитометрии в каналах PE (PI, иодид пропидия) и FITC (AnnexinV-FITC). ( a ) Типичный пример анализа. Первоначальные затворы (P1) в каналах FSC/SSC были сделаны для исключения мелкого мусора. Ворота Q1, Q2 (апо/некро), Q3 (живые) и Q4 (апо) соответствуют некротическим, позднеапоптотическим/некротическим, живым и ранним апоптотическим клеткам соответственно. ( b ) Изменения доли живых, ранних апоптотических и позднеапоптотических/некротических клеток представлены в виде среднего значения ± стандартное отклонение, (*) определяет различия для р < 0,05 ( t -тест) с контролем.

Рисунок 5

Хлорохин усиливает цитотоксический эффект…

Рисунок 5

Хлорохин усиливает цитотоксический эффект КАП и изменяет биогенез КАП-зависимых лизосом. Ячейки…

Рисунок 5

Хлорохин усиливает цитотоксический эффект КАП и изменяет биогенез КАП-зависимых лизосом. Клетки подвергают ИПП (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, рабочий газ — гелий, расход газа — 9 л/мин). Хлорохин (CQ, 20 мкМ) добавляют к клеткам после обработки CAP. ( a ) Анализ жизнеспособности (MTT) проводят через 24 часа после обработки CAP и CQ. ( b , c ) Анализ лизосом в обработанных CAP клетках 24 после воздействия CAP. Клетки окрашивают акридиновым оранжевым (AO, 1 мкг/мл) и анализируют методом проточной цитометрии в канале APC (Ex/Em = 59).5/660 нм). ( b ) Репрезентативные изображения анализа проточной цитометрии клеток A549. P4 — АО-положительная (лизосомоположительная) популяция. P4 (%) основан на разнице между аутофлуоресцентным сигналом (необработанные клетки, без АО) и сигналом от контрольных клеток, обработанных АО. Начальное стробирование в каналах FS/SS выполняется, как показано на рис. S2 в дополнительных материалах. ( c ) Обобщенные данные проточной цитометрии для клеток A549 и Wi-38. Данные представлены как среднее значение АО-положительных клеток ± стандартное отклонение. ( d , e ) Анализ A549 LysoTracker-позитивных клеток методом проточной цитометрии. ( d ) репрезентативный анализ через 24 часа после воздействия CAP; P2 (%) основан на разнице между аутофлуоресцентным сигналом (необработанные клетки, без LysoTracker) и сигналом от контрольных клеток, обработанных LysoTracker ( и ). Суммарные данные проточной цитометрии для A549 через 6 ч и 24 ч после воздействия CAP. Лизотрекер-положительные клетки ± стандартное отклонение

Рисунок 6

Просвечивающие электронные микрофотографии, показывающие…

Рисунок 6

Просвечивающие электронные микрофотографии, показывающие ультраструктуру клеток A549, обработанных CAP. Образцы…

Рисунок 6

Просвечивающие электронные микрофотографии, показывающие ультраструктуру клеток A549, обработанных CAP. Образцы контрольных клеток и клеток, подвергшихся воздействию CAP, готовят через 24 ч после облучения CAP (60 с). Ультратонкие срезы. Типичный пример фрагментов клеток. 1 — ядро, 2 — ядрышко, 3 — цитоплазма, 4 — аппарат Гольджи, 5 — митохондрии, 6 — шероховатый эндоплазматический ретикулум, 7 — мультивезикулярное тельце, 8 — пучки промежуточных филаментов.

Рисунок 7

Активность CatD при раке и…

Рисунок 7

Активность CatD в раковых и нормальных клетках после воздействия CAP. Анализ клеток…

Рисунок 7

Активность CatD в раковых и нормальных клетках после воздействия CAP. Анализ лизатов клеток проводили через 30 мин, 2 ч, 5 ч и 8 ч после КАП (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, рабочий газ — гелий, поток газа — 9л/мин, 1 мин лечения). ОЕФ — относительные флуоресцентные единицы. Различия достоверны с * p < 0,05 между контрольной и экспериментальной группами.

Рисунок 8

Зависящие от времени изменения относительной…

Рисунок 8

Зависящие от времени изменения относительных уровней мРНК генов, связанных с аутофагией. А549и ячеек Wi-38…

Рисунок 8

Зависящие от времени изменения относительных уровней мРНК генов, связанных с аутофагией. Клетки А549 и Wi-38 подвергались КОП в течение 1 мин (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, поток гелия 9 л/мин). DESeq2 нормализовал данные RNA-Seq. Представлены кривые индивидуальных уровней мРНК в образцах. Медиана двух независимых экспериментов. Критерий Стьюдента t для статистического анализа, (*)— p < 0,05 между контрольной и опытной группами соответственно.

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после…

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после лечения CAP. Репрезентативные вестерн-блоты показывают изменения в…

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после лечения CAP. Типичные вестерн-блоты показывают изменения в белках, связанных с аутофагией. Целые клеточные лизаты готовят для анализа с использованием b-тубулина в качестве контроля загрузки. Клетки A549 ( a ) и Wi-38 ( b ) подвергают ИПП в течение 1 мин (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, поток гелия 9 л/мин). CQ добавляют отдельно или к клеткам после обработки CAP до конечной концентрации 20 мкМ.

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после…

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после лечения CAP. Репрезентативные вестерн-блоты показывают изменения в…

Рисунок 9

Изменения клеточных белков после лечения CAP. Типичные вестерн-блоты показывают изменения в белках, связанных с аутофагией. Целые клеточные лизаты готовят для анализа с использованием b-тубулина в качестве контроля загрузки. А549( a ) и Wi-38 ( b ) подвергают ИПП в течение 1 мин (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, поток гелия 9 л/мин). CQ добавляют отдельно или к клеткам после обработки CAP до конечной концентрации 20 мкМ.

Рисунок 10

Изменения в митохондриальных белках…

Рисунок 10

Изменения митохондриальных белков после обработки CAP в клетках A549. Представитель…

Рисунок 10

Изменения митохондриальных белков после обработки САР в клетках А549. Репрезентативные вестерн-блоты, показывающие изменения в белках PINK1 и Drp1. Анализировали митохондриальную фракцию и использовали ЦОГ IV в качестве контроля нагрузки. Клетки А549 подвергались КОП в течение 1 мин (амплитуда напряжения 3,5 кВ, частота тока 50/4 кГц, поток гелия 9л/мин). CQ добавляли к клеткам отдельно или после обработки CAP до конечной концентрации 20 мкМ.

См. это изображение и информацию об авторских правах в PMC

.

Похожие статьи

• Модулирование лизосомальной функции посредством пермеабилизации лизосомных мембран или подавления аутофагии восстанавливает чувствительность к цисплатину в рефрактерных клетках немелкоклеточного рака легкого.

  Circu M, Cardelli J, Barr MP, O’Byrne K, Mills G, El-Osta H. Цирку М и др. ПЛОС Один. 2017 сен 25;12(9)):e0184922. doi: 10.1371/journal.pone.0184922. Электронная коллекция 2017. ПЛОС Один. 2017. PMID: 28945807 Бесплатная статья ЧВК.

• Хлорохин ингибирует рост клеток рака легкого человека A549, блокируя аутофагию и индуцируя митохондриально-опосредованный апоптоз.

  Лю Л., Хань С., Ю. Х., Чжу В., Цуй Х., Чжэн Л., Чжан С., Юэ Л. Лю Л. и др. Представитель Oncol, июнь 2018 г.; 39(6):2807-2816. дои: 10.3892/или.2018.6363. Epub 2018 12 апр. Онкол Респ. 2018. PMID: 29658606

• Идентификация соединения CA-5f в качестве нового ингибитора аутофагии на поздних стадиях с мощным противоопухолевым действием против немелкоклеточного рака легкого.

  Чжан Л., Цян П., Ю Дж., Мяо И., Чен З., Цюй Дж., Чжао К., Чен З., Лю И., Яо Х., Лю Б., Цуй Л., Цзин Х., Сунь Г. Чжан Л. и др. Аутофагия. 2019 март; 15 (3): 391-406. дои: 10.1080/15548627.2018.1511503. Epub 2018 6 сентября. Аутофагия. 2019. PMID: 30145925 Бесплатная статья ЧВК.

• Цитотоксическая и противоопухолевая активность лактаптина в сочетании с индукторами и ингибиторами аутофагии.

  Багаманшина А.В., Троицкая О.С., Нуштаева А.А., Юнусова А.Ю., Старикович М. О., Кулигина Е.В., Кит Ю.Ю., Рихтер М., Вольфромм Ф., Кане Т., Лаврик И.Н., Рихтер В.А., Коваль О.А. Багаманшина А.В. и соавт. Биомед Рез Инт. 2019 17 июня; 2019: 4087160. дои: 10.1155/2019/4087160. Электронная коллекция 2019. Биомед Рез Инт. 2019. PMID: 31317028 Бесплатная статья ЧВК.

• Регулирование аутофагии способствовало терапевтической эффективности ингибирования пути sonic Hedgehog при аденокарциноме легкого за счет подавления GLI2 и продукции АФК.

  Фань Дж., Чжан С., Ван С., Чен В., Ли И., Цзэн С., Ван И., Луан Дж., Ли Л., Ван З., Сунь Х., Шен Б., Джу Д. Фан Дж. и др. Клеточная смерть Дис. 201919 августа; 10 (9): 626. doi: 10.1038/s41419-019-1840-6. Клеточная смерть Дис. 2019. PMID: 31427566 Бесплатная статья ЧВК.

Посмотреть все похожие статьи

Рекомендации

1. 1. Кейдар М. Плазма для лечения рака. Источники плазмы Sci. Технол. 2015;24:033001. дои: 10.1088/0963-0252/24/3/033001. — DOI
2. 1. Метельманн Х.-Р., Недрелов Д.С., Зеебауэр К., Шустер М., фон Ведтке Т., Вельтманн К.-Д., Киндлер С., Метельманн П.Х., Финкельштейн С.Е., Фон Хофф Д.Д. и др. Лечение рака головы и шеи и физическая плазма. клин. Плазма Мед. 2015;3:17–23. doi: 10.1016/j.cpme.2015.02.001. — DOI
3. 1. Калгатги С., Келли С.М., Черчар Э., Тораби Б., Алексеев О., Фридман А. , Фридман Г., Азизхан-Клиффорд Дж. Влияние нетепловой плазмы на клетки млекопитающих. ПЛОС ОДИН. 2011;6:e16270. doi: 10.1371/journal.pone.0016270. — DOI — ЧВК — пабмед
4. 1. Джа Ким С., Мин Джо Х., Чанг Т.Х. Продукция внутриклеточных активных форм кислорода и изменение жизнеспособности клеток, индуцированное плазмой атмосферного давления в нормальных и раковых клетках. заявл. физ. лат. 2013;103:153705. дои: 10.1063/1.4824986.